ELISA法与胶体金法检测血液抗-HIV结果对比分析

ELISA法与胶体金法检测血液抗-HIV结果对比分析

【摘要】目的 了解ELISA法与胶体金法检测血液抗-HIV的灵敏度、特异性以及ELISA法测定的s/co值的强、弱与胶体金法的符合率。方法 采有用两种ELISA试剂同时检测抗-HIV抗体，对任何一种呈反应性的标本均进行双孔复查，同时用胶体金法进行检测，复查仍为阳性反应的标本，留取同源血袋血浆及填报资料一同送市疾病预防控制中心用WB法进行确认。结果ELISA法检测抗-HIV呈阳性反应的156人份血液中有1 05例WB法确认为阳性，阳性率为67. 31%，其中95例为胶体金法阳性，符合率为90.48% (95／105)；ELISA法呈强阳性反应与ELISA法呈弱阳性反应的WB法确认阳性率比较x 2=100.30，P<O.Ol。结论 ELISA法检测试剂不同的厂家存在技术的差异，都有一定的漏检率及假阳性率，胶体金法因方法学原因，存在漏捡和检测假阳性的可能；ELISA法检测抗-HIV呈SlOD值呈强、弱阳性结果确认为阳性中存在显著性差异，SlOD值越高，与WB法试验结果符合率越高。

为了了解ELISA法与胶体金法的灵敏度、特异性以及ELISA法测定的S／CO值的强、弱与胶体金法的符合率，笔者对本市2005～2011年份检测的无偿献血者份标本的HIV-Ab检测结果进行回顾性分析比较，结果报告如下：

1材料与方法

1.1标本来源

2005～2011年贵港市无偿献血者200 603人份血样，其中ELISA法检测抗-HIV呈反应性标本156人份。

1.2仪器与试剂

Uranus全自动酶免仪、Xantas加样器、佰乐7515型洗板机。使用ELISA试剂（北京万泰公司、珠海丽珠公司、厦门新创公司、北京金豪公司及荷兰生物梅里埃）及胶体金试剂（杭州艾康）。

1.3方法

采有用两种ELISA试剂同时检测抗-HIV抗体，对任何一种呈反应性的标本均进行双孔复查，同时用胶体金法进行检测，复查仍为阳性反应的标本，留取同源血袋血浆及填报资料一同送市疾病预防控制中心用WB法进行确认。ELISA法S／CO（S为标本OD值，CO为临界OD值）>5.6定为强阳性，S／CO值在1N 5.6定为弱阳性，S／CO值在0.8～1定为灰区（可疑），S／CO值<0.8为阴性。各种试剂均经批批检合格产品，操作严格按照试剂说明书进行；采用x-检验计算器1.61软件进行数据处理，x2检验分析，P< 0.05有统计学意义。

2结果

见表1，ELISA法检测抗-HIV呈阳性反应的156人份血液中有105例WB法确认为阳性，阳性率为67.31%，105例中有95例为胶体金法阳性，符合率为90.48%。

表1ELISA法检测抗-HIV呈强、弱阳性反应与胶体金法、WB法结果比较

3讨论

目前，由于地区差异及财政支持力度的不同，对无偿献血血液进行抗- HIV检测的方法和技术存在一定的差异，而世界各国的血液筛查项目中几乎均包括HIV检测，有的发达国家已开始用核酸检测方法直接检测病毒。了解不同检测方法进行抗- Hiv检测的灵敏度及特异性，对血液检测准确性有更好的帮助，ELISA法检测试剂不同的厂家存在技术的差异，都有一定的漏检率及假阳性率，笔者对156例ELISA法检测抗-HIV抗体呈阳性反应的假阳性率为32.69%，胶体金法的假阳性率为5.77%(9／156)，漏检率为6.41% (10/105)。胶体金法因方法学原因，存在漏检和检测假阳性的可能，ELISA法确认为阳性的105例中胶体金法有95例为阳性符合率为90.48%，说明S／OD值越高，与胶体金法试验结果符合率越高。所以用胶体金法在基层用血机构的急诊用血时，对血液进行抗-HIV初筛能大大降低输血的风险，但所有的检测结果应以确认实验室的确认报告为准，对结果的反馈更要慎重。

ELISA法检测抗-HIV呈S／OD值呈强、弱阳性结果确认为阳性中存在显著性差异，两种ELISA试剂检测同时呈强阳性反应的104例中有87例经WB法确认为阳性，符合率为83.65%，说明S/OD值越高，与WB法试验结果符合率越高。两种ELISA试剂检测同时呈弱阳性反应的52例中只有8例经WB法确认为阳性，符合率为15 .39%，说明S/OD值越低，与WB法试验结果符合率越低。而单一ELISA试剂呈阳性反应的结果，胶体金法及WB法均为阴性，所以单一ELISA法试剂呈阳性反应的假阳性率非常高，对无偿献血者的血液检测中，单一ELISA法试剂检测抗-HIV抗体呈阳性反应的信息，笔者认为，为了减少对社会的不利影响，以其他项目对其血液进行报废，但必须留取同源血袋血浆及填报资料一同送市冷疾病预防控制中心用WB法进行确认。

艾滋病流行形势日益严重，目前检测的普及性和便利性仍不足，因此借献血再次检测的可能性仍然存在，而HIV感染者受到的相关羞辱与歧视依然严重，不能排除极个别感染者出现报复社会的倾向，所以加强对血液进行抗-HIV的检测尤为重要，且贵港市是HIV感染的高发区，在本市使用ELISA法试剂和其它初筛试剂联合检测抗-HIV时，应同时考虑ELISA法的反应强度(S/OD)与筛查方法的结果，同时必须考虑试剂的质量、敏感度、特异性，在经济条件好或政府资金的支持下使用核酸检测，尽可能缩短HIV的窗口期。